蛋白A的優(yōu)勢在于其高流速和強結(jié)合能力，適合大規(guī)?？贵w純化。局限性包括非特異性結(jié)合和在特定條件下的穩(wěn)定性問題。

通過重組表達(dá)去除N端白蛋白結(jié)合結(jié)構(gòu)域后，蛋白G的血清蛋白結(jié)合水平降低，從而減少了非特異性結(jié)合，提高了純化效率。

蛋白L適用于抗體片段的純化以及那些不能被蛋白A和G有效結(jié)合的抗體亞型，如一些人源kappa輕鏈抗體。

主要區(qū)別在于PAM識別和切割末端。As Cas12a識別5'-TTTV PAM序列并產(chǎn)生交錯末端，而Cas9識別5'-NGG PAM序列并產(chǎn)生平末端。交錯末端在某些應(yīng)用中更有利于DNA序列的精確方向整合。

As Cas12a(Cpf1)與crRNA形成的核糖核蛋白（RNP）轉(zhuǎn)移到細(xì)胞中，更安全、快速，脫靶效應(yīng)低，編輯效率高，逐漸成為CRISPR基因編輯的有效方式。

推薦將As Cas12a(Cpf1)核酸酶與Cas12a crRNA以等摩爾量結(jié)合。C末端帶有SV40 NLS和nucleoplasmin NLS兩個核定位信號，以及TEV蛋白酶切位點和6xHis標(biāo)簽，以確保最佳編輯效果。

人源基因敲除質(zhì)粒是一種用于基因編輯技術(shù)的載體，通過構(gòu)建并轉(zhuǎn)染細(xì)胞，可以模擬特定基因的缺失或突變，從而研究該基因在疾病發(fā)生中的作用。

所有sgRNA文庫細(xì)胞pool構(gòu)建完成后都會通過NGS檢測覆蓋度，保證產(chǎn)品質(zhì)量。

微生物CRISPR文庫在生物醫(yī)學(xué)研究、癌癥治療、農(nóng)業(yè)改良、遺傳性疾病治療以及微生物基因功能研究等多個領(lǐng)域都有重要的應(yīng)用。

分子育種：家畜和家禽的基因篩查有助于了解與其生長、繁殖、疾病、肉質(zhì)等關(guān)鍵經(jīng)濟性狀相關(guān)的分子機制。

CRISPR基因篩選系統(tǒng)為分子育種提供了大規(guī)模篩選的工具，推動了高效、多維度篩選工作的可行性。

抗病育種：利用豬全基因組CRISPR敲除文庫篩選與病毒感染相關(guān)的宿主因子，如PDCoV、ASFV等，為制備抗病毒遺傳修飾豬提供了新的靶標(biāo)。通過研究豬對乙型腦炎病毒(JEV)等疾病的抗性，為豬的抗病育種工作帶來了新的方向。

疾病研究：利用豬全基因組CRISPR敲除文庫篩選與病毒感染相關(guān)的宿主因子，有助于了解病毒的感染機制，尋找有效的防控措施。篩選出的與病毒感染相關(guān)的宿主因子，如腸道黏膜屏障相關(guān)基因、細(xì)胞因子和炎癥相關(guān)基因、病毒受體相關(guān)基因等，為疾病的治療和預(yù)防提供了新的思路。

分子育種：雞全基因組敲除文庫為分子育種提供了大規(guī)模篩選的工具，推動了高效、多維度篩選工作的可行性。通過精準(zhǔn)地敲除或編輯與生長、繁殖、疾病、肉質(zhì)等關(guān)鍵經(jīng)濟性狀相關(guān)的基因，有助于深入了解這些性狀的分子機制，并可能通過遺傳改良優(yōu)化家禽的生產(chǎn)性能。

基因功能研究：雞全基因組敲除文庫為基因功能研究提供了豐富的工具，可以快速、準(zhǔn)確地定位并研究基因的功能。通過敲除特定基因，可以觀察其在生物體中的表達(dá)模式、調(diào)控機制以及與其他基因的相互作用關(guān)系，從而揭示基因在生命活動中的作用。

可用于藥物開發(fā)、基因功能研究、疾病模型建立、基因編輯和基因治療以及復(fù)雜生物系統(tǒng)解析等多個領(lǐng)域